條文本
PDF
文摘
介紹世衛組織建議每日口服補鐵對12周在婦女和青少年貧血發生率大於40%。然而,如果缺鐵性貧血的主要原因,然後,在最好的情況下,沒有針對性補鐵是浪費資源;在最糟糕的情況下,這可能造成傷害。此外,不同形式的鐵與不同生物利用度可能存在更大的風險的危害。
和分析方法補充一個為期12周的三臂、雙盲、隨機對照試驗是在柬埔寨進行確定與非針對性補鐵相關的潛在危害。我們將招募和隨機選擇480名懷孕婦女成熟女性(年齡18 - 45歲)接受三種幹預措施之一:60毫克元素鐵和硫酸亞鐵(標準,常用的形式),18毫克bisglycinate亞鐵(高度可利用氨基酸螯合鐵)或安慰劑。我們將測量鐵蛋白濃度(評估non-inferiority之間的兩種形式的鐵),以及標記潛在危害的血液和糞便(糞便calprotectin腸道病原體的豐富和DNA損傷)在基線和12周。Mixed-effects廣義線性模型將被用來評估鐵鐵蛋白濃度的影響,在12周的潛在危害的標誌。
道德和傳播倫理批準來自英屬哥倫比亞大學的臨床研究倫理委員會(h18 - 02610),兒童和婦女健康中心的不列顛哥倫比亞研究倫理委員會(h18 - 02610)和國家衛生研究倫理委員會在柬埔寨(273 - nechr)。將發表在同行評審期刊上的研究結果,提出了利益相關者和全球政策製定者和共享在參與者的社區。
試驗注冊號碼ClinicalTrials.gov注冊表(NCT04017598)。
- 柬埔寨
- 貧血
- 鐵
- 缺鐵
- 血紅蛋白病
- 腸道炎症
- 病原體生長
- 女性
這是一個開放的分布式條依照創作共用署名非商業性(4.0 CC通過數控)許可證,允許別人分發,混音,適應,建立這個工作非商業化,和許可他們的衍生產品在不同的協議,提供了最初的工作是正確地引用,給出合適的信用,任何更改表示,非商業使用。看到的:http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/。
來自Altmetric.com的統計
本研究的優點和局限性
這個試驗將會是第一個來評估潛在危害女性每日口服補鐵的,按照2016年世界衛生組織的全球政策。
審判將探索更多的鐵生物可利用形式的使用(bisglycinate亞鐵)與標準相比鐵鹽(硫酸亞鐵)。
研究設計是一個嚴格的雙盲隨機安慰劑對照試驗。
全麵測量大量的營養和炎症狀態和遺傳學標記血液、DNA和凳子。
潛力的識別其他不良結果不以我們的補充試驗可能表明鐵的風險(例如,脂質過氧化作用)。
介紹
2016年,世衛組織實施了全球政策建議每日口服補鐵(60毫克鐵)12周在婦女和青少年貧血發生率大於40%,如在柬埔寨。1世界衛生組織的政策是基於假設大約50%的低收入國家的貧血是由於缺鐵和鐵的補充完善的福利iron-depleted女性。2然而八最近的調查懷孕婦女在七個國家報告了令人驚訝的低流行率基於inflammation-adjusted鐵蛋白的鐵缺乏(0% - -8% < 15µg / L)。3-11如果缺鐵貧血的主要原因,然後在最好的情況下,沒有針對性補鐵是浪費資源;在最糟糕的情況下,這可能造成傷害。
因此,鑒於政策和大規模的全球範圍的實現,迫切需要確定是否有傷害與非針對性補鐵。然而,迄今為止,大多數研究的補鐵效果未能評估危害超出胃腸道副作用。這是不足夠的,因為鐵是氧化和炎性反應的催化劑。12日13多餘的鐵會導致氧化應激,14日15DNA和細胞損傷,15—和與糖尿病神經病變和某些癌症。月19 - 21日嬰兒和兒童的研究顯示減少增長,22日23日受損的發展24 - 26日並增加發病率。23 -未被吸收的鐵過剩結腸還可以增加對病原體的易感性的增長。13 30 -腸道病原體豐富和腸道炎症被認為是在肯尼亞兒童劑量升高的鐵的1/12(8%)目前推薦的劑量。13 32
補鐵在柬埔寨
在過去的十年裏,柬埔寨政府采取了許多政策通過補充戰鬥貧血,然而根據鐵蛋白測量報告的2014人口和健康調查中,隻有3%的柬埔寨婦女有45%的女性貧血缺鐵。33在2015年,我們進行了口服補鐵試驗(12周的60毫克鐵)在809年predominantly-anaemic女性成熟女性(年齡18 - 45歲)在柬埔寨。我們發現缺鐵性貧血的不是原因我們大部分的群體:78%是iron-replete在基線(鐵蛋白> 15µg / L)。然而,74%有遺傳性血紅蛋白病,主要α-thalassemia或血紅蛋白E變體。34補鐵的潛力造成傷害是特別重要的女性基因血紅蛋白病,因為這些疾病造成改變鐵代謝和鐵過載的風險增加。35
補鐵和腸道微生物群的影響
鐵是一種生存限製的養分,這是必不可少的許多腸道細菌爭奪未被吸收的膳食鐵在結腸。36-38與許多腸道革蘭氏陰性細菌,收購鐵毒性中起著至關重要的作用和殖民的物種等誌賀氏杆菌,沙門氏菌和大腸杆菌。36 39 40腸道的有益菌提供了重要的屏障作用,防止enteropathogens的殖民化。41互利共生的細菌,如乳酸杆菌,不需要鐵,因此,不增加比例的病原菌的存在鐵。42隻有一些種類的細菌使用鐵,增加補充鐵未被吸收的傳遞到結腸可能修改結腸微生物群組成,以及有利於病原菌在有益的細菌的增長。37平衡的腸道微生物群的變化觀察到條件涉及的腸道炎症。炎症微環境是特別有利的花朵enterobacterial物種,導致腸道傷害,否則會在豐度相對較低。43然而,很少有研究調查的影響補鐵在腸道微生物群的動態和研究不同鐵化合物與不同的生物利用度。
全球補鐵(沒有缺鐵和血紅蛋白病患病率高的地區)另外引起關注,因為是最常見的一種補充,硫酸亞鐵,吸收較差。一般< 20%的十二指腸鐵吸收,剩下的通過未被吸收的量進入結腸,44這有助於enteropathogens的毒性和殖民。36 39 45硫酸亞鐵也顯示出刺激胃粘膜,引起胃腸道副作用如痙攣,惡心,便秘,46因此影響病人的補鐵治療的依從性和療效的形式的鐵。一個高度穩定的氨基酸螯合鐵,亞鐵bisglycinate,變得越來越流行,因為它的生物利用度是兩到四倍'傳統'鐵鹽,47-50即硫酸亞鐵和胃腸道副作用較少有關。51由於其化學成分,它並沒有形成不溶性化合物物質含量高的鐵的吸收抑製劑,如肌醇六磷酸酯穀類食物中發現的,49包括大米、占很大一部分的柬埔寨的飲食。
據我們所知,沒有研究已經報道了補鐵的關係,傷害腸道沒有懷孕生育年齡的婦女。鐵強化的效果對腸道病原體豐富兒童的檢查。139年象牙海岸的兒童、鐵強化餅幹顯著增加糞便腸道菌的豐度與糞便calprotectin水平增加,腸道炎症的一個標誌,而乳酸杆菌數量減少。52當含鐵粥給115年肯尼亞嬰兒,修改觀察腸道微生物通過增加糞便calprotectin和腸杆菌的數量豐富,包括誌賀氏杆菌和致病性大腸杆菌雙歧杆菌減少,轉向一個更致病性腸道細菌概要文件。13鐵集團也增加了糞便calprotectin水平,再次表明腸道炎症。13有一些證據表明,鐵強化發展中國家的嬰兒和兒童與腸道失調與增強enteropathogens和炎症的存在。很明顯,缺乏高質量的數據調查的潛在危害沒有針對性補鐵在生育年齡的婦女或iron-replete個人。
研究目標和結果的措施
本研究的目的是(1)評估18毫克鐵的non-inferiority bisglycinate亞鐵(實驗)與60毫克鐵為硫酸亞鐵(標準治療)的意思是鐵蛋白濃度在12周(2)來確定60毫克鐵為硫酸亞鐵(按照世衛組織全球政策)增加女性潛在危害的生物標誌物在12周,與安慰劑相比bisglycinate亞鐵或18毫克鐵。
我們假設18毫克亞鐵bisglycinate將盡可能有效的60毫克硫酸亞鐵在增加鐵蛋白濃度超過12周,女性接受12周60毫克硫酸亞鐵會增加潛在危害的生物標誌物,相比之下,女性接受安慰劑或18毫克每日口服鐵bisglycinate亞鐵。
主要結果的第一目標是inflammation-adjusted53意思是血清鐵蛋白濃度(µg / L) 12周。缺鐵會被定義為inflammation-adjusted血清鐵蛋白濃度< 15µg / L,作為世衛組織推薦的生育年齡的婦女。53-55第二個目標測量潛在危害的主要結果是糞便calprotectin濃度(毫克/公斤糞便)。潛在危害的次要結果測量是腸道病原體豐富,腸道寄生蟲豐富和DNA損傷。二級生化狀態包括炎症標記結果測量:1-acid糖蛋白(AGP (g / L))、C反應蛋白(CRP(毫克/升));血紅蛋白(g / L),還有全血細胞計數(CBC)的一部分,包括平均微粒體積(MCV, fL),意思是微粒血紅蛋白(婦幼保健,pg)、紅細胞分布寬度(RDW, %)和網織紅細胞計數紅細胞(%);葉酸(ng / mL),維生素B12;報告副作用作為生活質量的措施和存在遺傳性血紅蛋白疾患。
和分析方法
研究設計和設置
這是一個三杆,雙盲隨機安慰劑對照試驗育齡婦女在部落托姆省,柬埔寨。這項研究顯示了數據收集的時間和進度圖1。研究發生在農村地區,涉及女性生活在村莊下以下衛生中心:獵物Kuy, Tboung Krapeu Srayov。詳細試驗協議是按照標準協議開發的項目:建議介入試驗指南。本研究將與海倫·凱勒國際合作,柬埔寨(HKI)(金邊,柬埔寨)和柬埔寨衛生部(金邊,柬埔寨)。資金是來自加拿大衛生研究院的研究。
學習時間和進度為補鐵試驗數據收集在小村莊托姆,柬埔寨。
參與者
女性滿足選擇標準並簽署知情同意的形式收到信息後將招收研究的目標和協議。
入選標準:成熟女性年齡在18 - 45歲女性顯然是健康,同意參與研究和提供血液,聚集直腸拭子和糞便樣本,打算研究期間居住在試驗位置。
排除標準:在任何已知的疾病或疾病,懷孕,服用抗生素、非甾體抗炎藥、膳食補充劑或維生素和礦物質補充劑在前麵的12周。
招聘
經驗豐富的當地的研究人員和抽血者將在部落期間托姆審判監督資格篩選、招聘、行為數據和樣本收集、平板分布、監控、報告和谘詢。選擇研究村莊將從列表中隨機選擇的所有村莊。溝通關於這項研究將首先與社區村莊領導人磋商,緊隨其後的是敏化作用社區的活動與當地衛生專業人員分享信息和學習當地語言的細節(紅色)。研究小組將會見潛在的參與者,屏幕的資格,獲得許可和登記。在最初的家庭訪問,女性將了解的目的,研究的目標和協議,以及資格和排除標準。一旦獲得書麵同意(簽名)參與研究和願意提供血液,聚集糞便拭子和糞便樣本,這個女人將參加這項研究。招聘將繼續在滾動的基礎上到480年女性入學率。女人將有機會問問題,拒絕參與研究和/或在任何時候退出這項研究沒有結果或問題。撤軍的原因將被記錄,任何數據收集直到撤軍的日期將被保留進行分析。女性將知情同意的時候,如果他們在幹預期間懷孕,他們將被刪除從提供的研究和一個鐵和葉酸(按照目前的標準治療在柬埔寨)。
招聘2019年12月初開始招生。和健康中心工作人員和社區的敏化作用開始協商,繼續村長和村健康誌願者。
樣本大小
我們我們的計算基於non-inferiority鐵兩組之間的比較。檢測20µg non-inferiority保證金/ L鐵蛋白,80%力量和α= 0.05,我們需要在每一組n = 140。報告了一個臨床重要的改變在回應一個鐵鐵蛋白幹預為±0.2 SD單位。56數據從我們的2015的鐵蛋白試驗表明SD 50µg 60 mg / L 12周後鐵;34因此,選擇20µg / L的保證金。因此,我們需要在每個三組n = 140。追蹤損失占15%(一個保守的估計基於我們以前的試驗),34我們需要n = 160女性的三組,共有n = 480名女性的研究(圖2)。
參與流程圖。
隨機和盲
婦女健康中心將隨機水平比分配比的三個幹預由電腦隨機由摩根富林明列表。總共有480名婦女將隨機分配的目標160婦女每組。一個惟一的標識符分配給每個參與者。一個獨立的科學家決定幹預組補充瓶代碼對應。分配將隱藏於審判人員、研究人員和參與者,以防止偏見。隱藏分配序列將由外部協調當選的調查員。分配代碼仍將失明的主要研究者和整個研究團隊在審判之前的所有階段的主要結果進行了分析。的初步試驗無效符號執行隻由一個獨立的研究者認為必要的嚴重不良事件。
幹預
符合條件的女性將隨機獲得三種幹預12周:60毫克元素鐵和硫酸亞鐵(標準,常用的形式),18毫克bisglycinate亞鐵(高度可利用氨基酸螯合鐵)或安慰劑。補充生產實物因素的集團公司(高桂林、加拿大)。鐵和安慰劑藥片,除了元素鐵含量,相同的組成、味道、氣味和外觀。每個微晶纖維素的安慰劑片不含鐵元素。硫酸亞鐵片包含60毫克鐵元素是世衛組織全球政策補充所有女性的生育年齡60毫克鐵為12周。bisglycinate亞鐵片包含18毫克元素鐵、劑量選擇因其生物利用度大於鹽和鐵也是劑量通常在加拿大銷售。47-50
程序
招收女性參加招聘,參加總共5研究訪問:訪問1(基線,天0),訪問2(1天),訪問3(第一周),4(星期5)訪問,訪問5 (endline一周12)所示表1。在基線,研究人員將管理調查問卷收集社會人口和健康數據,包括信息混淆血液學的和胃腸道指標的因素,以及進行人體測量。婦女將會提供一個聚集直腸拭子和糞便樣本集合的容器。他們將被要求提供樣品收集在訪問2。糞便樣本可能收集基線如果樣品7天內無法收集訪問2,也就是說,如果女人是無法通過糞便或旅行。女性也會指示前一夜之間快速訪問2。
抽血者將收集早晨空腹血液樣本在第12周的第一天,村裏的中央位置。聚集直腸拭子和糞便樣本容器將被收集。村長和村健康誌願者將協助婦女動員在篩選和研究。靜脈血將收集在一個6毫升跟蹤得到管,包含EDTA 6毫升真空管,2毫升管包含EDTA(正)。血,聚集直腸拭子和糞便樣本容器將被放置在貨架在一個覆蓋冰箱和運輸2 - 4小時內收集的國家公共衛生研究所實驗室進行處理。
基線的收集血液,聚集直腸拭子和糞便樣本容器,女性將收到的三個幹預每組(n = 160),他們隨機。研究人員將為女性提供一個兒童安全螺釘帽包含88膠囊後基線采血瓶。膠囊數將在星期1,星期5,星期12監測依從性。提醒和後續訪問將被用於提高依從性並提醒女性朋友膠囊。女性將指示采取補充每天晚上在家裏有足夠的食物和水。補充劑的形式將平板電腦,序列號標簽,彩色貼紙確定治療,將雙盲,沒有已知的參與者和研究人員。研究人員將記錄的副作用報道,大劑量的鐵可能會導致腸胃不適,檢查症狀日記和鼓勵繼續堅持。額外的家訪或電話將根據需要,以確保參與者感到舒適的治療,有地回答他們的問題,記錄所有的副作用。
為期12周的研究中,完成後將提供營養教育小組所有女性,無論幹預的手臂,由訓練有素的研究人員信息良好的食物來源的鐵,預防貧血和實踐。
參與者和公眾參與研究
這項研究正在進行與柬埔寨衛生部合作,省級衛生部門和衛生操作地區部落托姆。參與者和公眾沒有參與研究設計或報告但將參與研究傳播(村會議參與者和開放社區分享研究結果)。
實驗方法及分析
一個完整的血細胞計數將使用一個自動進行血液學分析儀(Sysmex xn - 1000, Sysmex,神戶,日本)來測量血紅蛋白(g / L), MCV (fL)婦幼保健(pg), RDW紅細胞(%)和網織紅細胞計數紅細胞(%)。
血清血漿,淡黃色的外套,將存儲在2毫升cryovials在幹冰−80°C到裝運到加拿大進行分析或裝運其他機構(圖3)。將下列指標評估血清使用夾心ELISA57:鐵蛋白(µg / L)、可溶性轉鐵蛋白受體(血清)(毫克/升),AGP (g / L), c反應蛋白(毫克/升)和retinol-binding蛋白質(μmol / L)。鐵蛋白將調整後的炎症,使用修正因素合十禮等使用AGP和CRP值。53維生素B12(pmol / L)也將測量使用雅培AxSym auto-analyzer以適當的控製。血清葉酸(nmol / L)將用96孔板測量使用chloramphenicol-resistant微生物鑒定乳杆菌。58血清hepcidin (nmol / L)將測量使用Hepcidin-25生物活性免疫(DRG國際,斯普林菲爾德,新澤西,美國)。59毛細管血紅蛋白電泳將使用Sebia MINICAP分析器(血紅蛋白E計劃)檢測血紅蛋白病,包括正常的血紅蛋白(Hb,2和F)、血紅蛋白變體(Hb E、H和CS)和α-thalassemia。60DNA提取使用QiaAmp血液DNA從巴菲外套工具包(試劑盒),和一個多重PCR試驗將被用來評估為常見α-球蛋白基因刪除(α−3.7和α−4.2)。
血液采集協議。
糞便calprotectin將測量從新鮮糞便使用CALEX帽提取設備(意大利科潘SpA,布雷西亞,意大利)。61年新鮮糞便,提取的樣本和聚集直腸拭子將存儲在−20°C到裝船幹冰到加拿大進行分析。BUHLMANN fCAL ELISA (BUHLMANN實驗室AG)、Schonenbuch、瑞士)將被使用,選擇性測量calprotectin糞便提取物的夾心ELISA。
實時PCR核酸擴增試驗將進行聚集直腸拭子。62年BD馬克斯腸麵板(雙相障礙的診斷係統,魁北克,加拿大)將目標enteropathogens63年:沙門氏菌spp,彎曲杆菌spp,誌賀氏杆菌spp, enteroinvasive大腸杆菌,鼠疫enterocolitica,產腸毒素的大腸杆菌(ETEC),鄰單胞菌屬shigelloides和弧菌(訴vulnuficus,訴parahaemolyticus和霍亂弧菌),腸寄生蟲小組將目標:蘭伯氏賈第蟲,隱孢子蟲spp (c以及和c . hominis),痢疾阿米巴。64年
DNA損傷將會評估通過測量DNA單鏈斷裂,由橄欖尾巴表示運動與使用堿性單細胞凝膠電泳(彗星試驗)。65年
在150名婦女的一個子集從我們的試驗從每個審判臂(50),整個metagenome獵槍16 s rrna測序將進行糞便樣本,檢查細菌社區配置文件的每個部門的差異研究。66年
參與薪酬
所有的參與者將得到一個適當的參與補償在每個樣本收集點(基線和endline),如圍裙和魚醬。
學習管理和監控
網站主管每周將審查所有數據收集形式的完整性和協議偏離或違反HKI之前將它們發送到數據管理中心。
所有電子數據文件和硬盤數據的副本,同意表格、調查問卷和其他文件包含的數據將被保存在一個安全的地方,將保持鎖定在研究室部落托姆健康中心。CDK,香港和摩根富林明訪問數據庫數據收集期間,和所有的合作研究者們將可以訪問的數據在數據分析和解釋的所有階段。
數據監控將由研究協調員在招聘和參與者的後續研究。一個獨立的數據安全監測委員會尚未建立了這個簡短的研究由於其最小的風險對人類健康和補鐵劑量不足,或等於,當前的世衛組織建議的劑量。然而,任何不利影響將被注冊,選試驗安全官和首席研究員將通知。
數據分析計劃
主要結果的分析將一群之間non-inferiority比較意味著血清鐵蛋白在12周的使用普遍線性mixed-effects模型,控製基線鐵蛋白(固定效應)和健康中心集群(隨機效應),分配的優勢定義non-inferiority 20µg / L。56主要分析將執行一個意圖治療的基礎上,在所有參與者將會根據他們的分配分析治療組,不管補充協議執行。第二個按方案的分析將女性消費的一個子集上執行≥80%的膠囊在研究期間。結果測量的潛在風險,糞便證明鈣衛蛋白濃度大量的選擇並且enteropathogens三組在12周,將使用廣義線性模型,控製基線值和混雜變量。個人間DNA鏈斷裂的變化和腸道病原體的豐度可以通過使用每個女人作為自己的控製,通過paired-analysis方法。我們還計劃測試交互效果,看看結果相差一個女人的基線鐵狀態(iron-replete(鐵蛋白> 15µg / L)或iron-deplete(鐵蛋白< 15µg / L))或通過基因血紅蛋白病的存在與否。
所有統計分析將使用占據V.16(美國大學站StataCorp)和p值為0.05時將顯示統計學意義。
道德和傳播
道德的考慮
參與者將提供簽署知情同意(在線補充文件)在參與這項研究。參與者可以在任何時候退出這項研究沒有理由需要。倫理批準授予了英屬哥倫比亞大學的臨床研究倫理委員會(h18 - 02610),兒童和婦女健康中心的不列顛哥倫比亞研究倫理委員會(h18 - 02610)和國家衛生研究倫理委員會在金邊(273 - nechr)。這個試驗是在2019年7月ClinicalTrials.gov注冊。依法審判正在進行《赫爾辛基宣言》的倫理原則,國際法和良好的臨床實踐指南。
傳播計劃
研究小組計劃達到廣泛傳播的試驗結果,以確保廣泛的可見性的研究。我們將分享我們的研究在所有階段的項目通過協作努力與所有的利益相關者,合作夥伴和用戶知識如月柬埔寨營養工作組會議,那裏的研究人員和非政府組織參與營養研究和相遇。本研究的主要結果將通過至少一個出版,傳播和其他次要結果計劃,在開放獲取的同行評議期刊。此外,對話將啟動營養與關鍵利益相關者,和結果將會在相關會議,座談會,通過社交網絡和其他媒體渠道在加拿大,柬埔寨和國際化。這個試驗的結果將在完成研究報告按照標準報告的整合試驗指南。數據分析後,我們將返回研究衛生中心分享研究結果。任何婦女發現有缺鐵會收到3月供應的鐵補充劑的最後審判,不管幹預的手臂。
引用
腳注
貢獻者摩根富林明,DMG,再保險、香港和CDK導致審判的概念和設計協議。AA建議提供樣本計算和統計分析計劃。摩根富林明和CDK起草協議的手稿,作者的貢獻在最後階段評審和修訂和批準最終的手稿。摩根富林明領導和協調現場活動在柬埔寨和香港。在柬埔寨LXP支持領域的活動。CDK負責整個項目的協調和監督。
資金這個項目是由加拿大衛生研究院資助的研究項目(CIHR)授予(ID400771)。類型的因素中提供的營養補充劑是集團公司(高桂林、加拿大)。FecalSwab被意大利科潘水療中心提供的類(意大利布雷西亞)。
免責聲明投資者沒有參與研究設計和在收集過程中不會有任何作用,分析,解釋數據,或者決定提交出版的結果。
相互競爭的利益沒有宣布。
病人和公眾參與病人和/或公眾參與設計,或行為,或報告,或傳播本研究計劃。是指部分進一步了解細節的方法。
病人同意出版獲得的。
出處和同行評議不是委托;外部同行評議。