條文本gydF4y2Ba
文摘gydF4y2Ba
客觀的gydF4y2Ba檢測gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在尿液樣本的不育男性和男性沒有任何為了調查是否感染的跡象gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba和其他生殖支原體(gydF4y2Ba支gydF4y2Ba和gydF4y2BaUreaplasmagydF4y2Baspp)經常被發現在尿液樣本的不育男性比無症狀的控製和確定抵抗大環內酯類。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba研究包括第一空白尿液樣本取自145年不育男性和49歲男性尿道炎的症狀。gydF4y2Ba尿道支原體、沙眼衣原體gydF4y2Ba和gydF4y2Ba淋病奈瑟氏菌gydF4y2Ba被商業PCR檢測。gydF4y2Ba陰道毛滴蟲gydF4y2Ba是由顯微鏡檢測和文化。gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba和gydF4y2BaUreaplasmagydF4y2Baspp被檢測到的文化。gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba是傳統和實時PCR檢測到內部。gydF4y2Ba
結果gydF4y2Ba兩個gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba正樣本獲得的樣本中發現了男性不育。無症狀的男性都是gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba負的。大環內酯物抵抗不是中發現的兩個積極的樣本。gydF4y2Ba
結論gydF4y2Ba與報告數據相比,異常的患病率較低gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在不育男性被發現。這種意想不到的結果的原因是不知道;可能,當地人口和社會人口特征的影響結果。進一步的研究調查gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在不孕的患者和其他組織是必要的。gydF4y2Ba
- 微生物學gydF4y2Ba
- 流行病學gydF4y2Ba
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來自Altmetric.com的統計gydF4y2Ba
本研究的優點和局限性gydF4y2Ba
我們知道低兩組尿液樣本數量的參與者。gydF4y2Ba
這些隻是初步結果,意外與報告數據相比。然而,研究結果證實了在兩個獨立的實驗室排除實驗室錯誤的可能性。gydF4y2Ba
我們計劃繼續這項研究中,收集尿液樣本數量較大的不育男性,比較他們與男性尿道炎和無症狀的男性。gydF4y2Ba
如果結果是相似的(即意外小數量的男性gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba),我們將努力確定原因。gydF4y2Ba
介紹gydF4y2Ba
可靠的檢測gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2BaPCR檢測的發展後成為可能。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba的患病率gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Banon-gonococcal患者尿道炎(NGU)從13%到42%不等;在無症狀的人從0%降至15%。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba4gydF4y2Ba的影響gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在男性生育能力仍不清楚。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba
我們的目的是檢測gydF4y2Ba尿道支原體,gydF4y2BaM。gydF4y2BahominisgydF4y2Ba和gydF4y2BaUreaplasmagydF4y2Baspp第一空白尿液(FVU)樣品的不育男性和男性沒有任何症狀和/或感染的跡象,此外,確定大環內酯物耐藥性的流行gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba。我們限製我們的研究不育男性沒有以下常見的性傳播感染(性病):gydF4y2Ba沙眼衣原體、陰道毛滴蟲和淋球菌gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
據我們所知,這是第一個研究在克羅地亞進行檢測gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
方法gydF4y2Ba
這項研究是醫學院倫理委員會的批準,薩格勒布大學。這是克羅地亞科技部資助的一部分(108-1080114-0014):“微生物的分子檢測:他們對抗菌素的影響消費”。gydF4y2Ba
每個參與者提供書麵的知情同意,並完成了一份調查問卷說明理由出席,年齡,尿道炎的症狀,終生性伴侶,性傳播感染和最近的曆史/當前抗生素治療。gydF4y2Ba
FVU(約20毫升)來自病人;4 - 5毫升的每個樣本用於文化gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba、ureaplasmas和gydF4y2Bat .鞘突gydF4y2Ba。PCR檢測的gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba,gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba和gydF4y2Ban球菌gydF4y2Ba,4 - 5毫升的每個示例使用了。5毫升的原始FVU被凍結,運往斯塔頓在哥本哈根血清研究所供實時確認gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2BaPCR。樣品被立即處理gydF4y2Bam . hominis鞘突gydF4y2Ba和ureaplasmas。PCR檢測樣本存儲在−20°C。gydF4y2Ba
c . trachomatisgydF4y2Ba和gydF4y2Ban球菌gydF4y2Ba檢測到PCR (Cobas TaqMan CT / NG測試,V.2.0羅氏診斷,巴塞爾瑞士),所述的製造商,和尿道拭子檢測了嗎gydF4y2Ban球菌gydF4y2Ba文化(美國新澤西州洗液MTM)。gydF4y2Bat .鞘突gydF4y2Ba在修改鑽石中檢測到顯微鏡和文化(美國聖達菲Remel公司)。十三的不育男性和三個控製排除由於感染一個公認的STI (gydF4y2Ba沙眼衣原體gydF4y2Ba,gydF4y2Ba陰道毛滴蟲gydF4y2Ba和gydF4y2Ba淋病奈瑟氏菌gydF4y2Ba),留下194 FVU樣本。這些收集在聚丙烯容器(Sarstedt、Numbrecht、德國)人稱為臨床微生物學和皮膚病,臨床醫院中心薩格勒布。一百四十五樣本來自男性不育的調查的一部分。沒有人有任何生殖泌尿係感染的症狀,但都有一個異常精液質量分析(症,asthenozoospermia oligoasthenozoospermia)。不孕的女性伴侶被hysterosonosalpingography排除在外。gydF4y2Ba
49樣本從無症狀男性參加診所作為年度身體檢查的一部分。gydF4y2Ba
整除的尿液樣本(4 - 5毫升)準備生殖器支原體和分子的文化測試,分別。尿液樣本離心機3000×gydF4y2BaggydF4y2Ba5分鍾和沉積物接種urea-arginine肉湯(bioMerieux,裏昂,法國)和到A7瓊脂(美國馬裏蘭州,正欲Cockeysville)。瓶是培養48 h在37°C。瓊脂板在37°C 5%孵化有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba5天,顯微鏡下為典型的外觀檢查支原體殖民地。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba
其餘的尿液(4 - 5毫升)集中在20000×gydF4y2BaggydF4y2Ba15分鍾在4°C。20%的顆粒在200年resuspendedµL w / 100 v Chelex漿(美國σ)TE緩衝(10毫米Tris-HCl, pH值8.0,1毫米EDTA)。1分鍾的混合物是渦;然後放在一個thermoblock 10分鍾95°C。混合物是離心機短暫和上層清液吸進新管和儲存在−20°C到PCR所需。gydF4y2Ba7gydF4y2Ba
PCR檢測gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba兩對引物進行:第一個目標16 s rRNA基因:16 sfg2(5′有條件現金轉移支付乙CGT標記TTA貓TGT TTA), 16個分析(5′tga貓GCG CTT CCA ATA AA),gydF4y2Ba7gydF4y2Ba和第二個目標MgPa主要adhesin基因:MgPa1 (5′agt TGA TGA AAC CTT AAC CCC TTG G), MgPa3 (5′20 TTG gg GGT TTT CCA TTT TTG C)。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba
所有樣本的化驗檢查對PCR抑製內部控製,和兩個PCR進行如前所述。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9gydF4y2Ba
PCR進行自動DNA熱循環(PCR係統9700,應用生物係統公司)。gydF4y2Ba
確認結果,原始的整除FVU樣本(5毫升)被運往斯塔頓血清研究所,哥本哈根,丹麥,它被一個inhibitor-controlled實時PCR檢測用引物檢測MgPa基因,如前所述。gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba
大環內酯物阻力調節地區23 s rRNA的V基因的突變檢測的DNA測序獲得的擴增子直接從臨床標本,丹麥哥本哈根和斯塔頓血清研究所的執行。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba
STATISTICA(數據分析軟件係統),V.10 (StatSoft公司(2011),美國)是用於數據分析。年齡中位數是用來描述組織和觀測的數量和比例來描述分類變量。比較組之間年齡Mann-Whitney U測試,並比較分類變量χgydF4y2Ba2gydF4y2Ba測試使用。p值< 0.05被認為是具有統計學意義的所有測試。gydF4y2Ba
結果gydF4y2Ba
控製的不育男性與年齡(z =−0.805, p = 0.421, Mann-Whitney U測試)。他們更經常報道性傳播感染(χ的曆史gydF4y2Ba2gydF4y2Badf = 1 = 14.443, p = 0.0001)和更多的終生性伴侶(χgydF4y2Ba2gydF4y2Badf = 2 = 35.734, p < 0.0001;gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
十三的不育男性和三個控製排除由於感染一個公認的STI (gydF4y2Ba沙眼衣原體gydF4y2Ba,gydF4y2Ba陰道毛滴蟲gydF4y2Ba和gydF4y2Ba淋病奈瑟氏菌gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
在不育男性患者之一gydF4y2Ban球菌gydF4y2Ba感染,一個病人被診斷為gydF4y2Bat .鞘突gydF4y2Ba和11個患者gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba積極的。這些樣品還測試了gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba,但都是負麵的。gydF4y2Ba
UreaplasmagydF4y2Baspp和gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba被孤立於相同比例的不育男性和無症狀的控製(χ嗎gydF4y2Ba2gydF4y2Ba= 0.435,p = 0.509;χgydF4y2Ba2gydF4y2Ba分別為= 0.021,p = 0.886)。隻有兩個樣本陽性gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba;兩組中男性不育(2/145;1.4%;95%可信區間0.2%到4.9%)。這些人是29歲,37歲,分別報道3和7終生性伴侶與大多數人相比有5 - 10的合作夥伴。gydF4y2Ba
在我們的實驗室,我們使用內部常規PCR(定性),結果證實史坦頓血清研究所在哥本哈根,丹麥的實時PCR。所有gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba結果是一致的,當樣本檢查實時PCR在哥本哈根。gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba負載有兩個積極的樣本是778拷貝/毫升(c /毫升)和6765 c / mL,分別。的男人gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba負載的778 c / mL被診斷出患有症,和其他gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba負載與asthenozoospermia 6765 c /毫升)。gydF4y2Ba
UreaplasmagydF4y2Baspp被發現在30%(43/145)不育的男性比例為35%(17/49)的無症狀的男性。gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba是積極的,21%(31/145)和20%(10/49)的不育男性和無症狀的男性,分別。gydF4y2Ba
在12個樣本不育男性合並感染gydF4y2BaUreaplasmagydF4y2Ba種蟲害和gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba被發現。組中的三個樣本被發現的無症狀男性合並感染。在積極的兩個樣品gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba,來自不育男性,沒有其他病原體。gydF4y2Ba
大環內酯物抵抗調停23 s rRNA基因的突變gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba沒有發現的兩個陽性樣品。gydF4y2Ba
討論gydF4y2Ba
這項研究表明低患病率gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在克羅地亞的薩格勒布地區男性不育。Ureaplasmas和gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba經常被發現在兩種不育男性和健康對照組,表明他們應該被認為是共生的。gydF4y2Ba
FVU樣本使用,因為一些研究報道,分子方法進行尿液樣本可以檢測一樣多,甚至更多,比傳統尿道拭子感染患者,或宮頸拭子或精液。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba沒有數據的患病率在克羅地亞生殖器支原體存在。gydF4y2Ba
在這項研究的流行gydF4y2BaUreaplasmagydF4y2Baspp不育男性之間沒有顯著性差異,無症狀的控製,並出現在大約三分之一的兩組。這強烈表明,ureaplasmas沒有在男性不育的一個重要的角色。gydF4y2Ba
我們沒有執行特定測試gydF4y2BaUreaplasmagydF4y2Baspp。大多數發表的研究報告的患病率ureaplasmas不育男性沒有區別gydF4y2Ba美國體gydF4y2Ba和gydF4y2Ba美國以及孢子。gydF4y2Ba數據並不確鑿的患病率gydF4y2Ba美國體gydF4y2Ba和gydF4y2Ba美國以及gydF4y2Ba。AbusarahagydF4y2Ba等gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba發現,gydF4y2Ba美國以及gydF4y2Ba是最常見的隔離檢測不育男性(90%)。gydF4y2Ba
m . hominisgydF4y2Ba中檢測出20%的無症狀男性和21%的不育男性,分別患病率高於其他一些研究。gydF4y2Ba12gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba被認為是正常菌群的尿道的流行gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba可能反映了盛行的細菌性陰道炎的男人的性伴侶,是嗎gydF4y2Bam . hominisgydF4y2Ba是與女性這個條件密切相關。gydF4y2Ba13gydF4y2Ba
的患病率gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在不同人群中明顯不同gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在我們的研究中,低。其他的研究也發現gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba很少見的FVU不育男性。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba這兩個積極的在我們的研究樣本來自145國集團不育男性和gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba沒有檢測到任何的控製。我們擔心技術問題可能造成患病率較低,因此,冷凍FVU樣本運到哥本哈根進行評估。然而,100%的結果被發現之間的一致性,表明的患病率gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在這個克羅地亞人口確實是很低。gydF4y2Ba
一個可能的感染與不孕關係多年來一直爭論的話題。據估計,隻有15%的男性不育有關生殖道感染。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba檢測細菌的生殖泌尿係統感染了樣品不一定建議但可能意味著殖民,汙染或感染。gydF4y2Ba
隻有少量的研究檢查了之間的關係gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba和男性不育gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba和這些研究沒有控製人口肥沃的男人。我們試圖設計一個研究,所有其他潛在的感染導致不孕的原因被排除在外。在最近研究的流行gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在不育男性患病率發現類似於美國(1.4%):4.8% Gdoura的研究gydF4y2Ba等gydF4y2Ba5gydF4y2Ba和3.2% Abusaraha的研究gydF4y2Ba等gydF4y2Ba。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba
研究結果為gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba,這是最常見的細菌引起NGU,是相同的。gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba在女性的輸卵管因素不孕的原因;在男性NGU原因。此外,它已被證明gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba附加到精子(表麵和核仁)。然而,男性不育的作用,喜歡的角色gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba,還不清楚。的患病率有顯著的變化gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba感染在男性不育從0%到42.3%不等,這取決於方法,樣品類型和不同人群的感染率的差異。在加拿大最近發表的一項研究gydF4y2Ba16gydF4y2Ba的患病率gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba感染不育男性,5588年是0.3%。作者的結論是,這顯然低流行率表明,男性不育是由一小部分gydF4y2Bac . trachomatisgydF4y2Ba。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba
我們試圖研究一群無症狀的男性尿道炎沒有控製,並發現都為陰性gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba。不幸的是,不育男性有更多的夥伴和以前也報道性傳播感染通常比控製,表明對照組低風險的行為。gydF4y2Ba
這兩個gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba陽性樣本檢測大環內酯物抗性和敏感。這是鼓勵考慮的廣泛使用阿奇黴素治療衣原體和未指明的尿道炎在克羅地亞。不可能提供的估計的患病率在這種細菌抵抗大環內酯類。顯然,更多的gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba積極的樣品應該測試,以指導今後的治療指南。gydF4y2Ba
異常低的比例gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在這項研究中被發現。這個意想不到的結果不能解釋的原因。進一步的研究調查gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在不育和其他組患者從克羅地亞是必要的。gydF4y2Ba
確認gydF4y2Ba
我們感謝Birthe多恩的技術援助gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba在史坦頓血清研究所測試,哥本哈根,丹麥。gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
腳注gydF4y2Ba
貢獻者gydF4y2Ba副總裁設計研究,負責問卷調查數據和數據分析,和寫手稿的一部分;LZ-S測試樣本gydF4y2Ba生殖支原體,gydF4y2Ba起草文章;VT計劃研究和寫文本的一部分;樣本收集和編輯女士手稿;SL收集樣本和問卷數據;JSJ測試樣本gydF4y2Ba尿道支原體gydF4y2Ba、手稿編輯和批準了最終版本;SP測試樣品和修正草案;我修改了手稿。gydF4y2Ba
資金gydF4y2Ba這項研究是克羅地亞科技部資助的一部分(108-1080114-0014):“微生物的分子檢測:他們對抗菌素的影響消費”。gydF4y2Ba
相互競爭的利益gydF4y2Ba一個也沒有。gydF4y2Ba
病人的同意gydF4y2Ba獲得的。gydF4y2Ba
倫理批準gydF4y2Ba倫理委員會,薩格勒布大學醫學院。gydF4y2Ba
出處和同行評議gydF4y2Ba不是委托;外部同行評議。gydF4y2Ba
數據共享聲明gydF4y2Ba沒有額外的數據是可用的。gydF4y2Ba