條文本
PDF
摘要
簡介世衛組織建議優先使用肺炎球菌結合疫苗(PCV)。然而，仍有許多國家尚未引入PCV，特別是在亞洲。本試驗旨在評估不同的PCV時間表，並提供PCV10和PCV13的正麵比較，以生成證據，以協助有關PCV引入的決策。將比較它們的免疫原性和對鼻咽運輸的影響鏈球菌引起的肺炎而且流感嗜血杆菌．
和分析方法這項隨機、單盲對照試驗招募了1200名2個月大的嬰兒參加六種嬰兒PCV計劃之一:PCV10在3+ 1,3 + 0,2 +1或兩劑量計劃;PCV13在2+1時間表;以及18和24個月接受兩劑PCV10的對照組。另外在18個月時招募了200名兒童作為對照組，他們在24個月時接受一劑PCV10。所有參與者都被隨訪到24個月大。主要結果是初級序列後免疫原性，表示為PCV10中每種血清型特異性抗體水平≥0.35µg/mL的參與者的比例。
道德和傳播已獲得北部地區衛生部人類研究倫理委員會、Menzies衛生研究學院(EC00153)和越南衛生部倫理委員會的倫理批準。研究結果、解釋和結論將在國內和國際會議上提交給父母和監護人，並發表在同行評審的開放獲取期刊上。
試驗注冊號碼NCT01953510；Pre-results。
- 臨床試驗
- 微生物學
- 流行病學
這是一篇開放獲取文章，按照創作共用署名(CC BY 4.0)許可條款發布，該許可允許其他人發布、混編、改編和構建本作品，用於商業用途，前提是原始作品被正確引用。看到的:http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
來自Altmetric.com的統計
本研究的優勢和局限性
本研究旨在解決單一研究中的兩個獨立問題:使用哪個時間表提供肺炎球菌結合疫苗(PCV)，以及使用哪個PCV。
本研究包括兩種獲得許可的pcv的正麵比較，允許直接評估它們的相對免疫原性和對鼻咽運輸的影響。
主要結果是用於許可和PCV時間表變化的標準。
本研究對鼻咽咽部轉運結果的影響相對較低，因此在轉運率低於預期的情況下，得出與這些結果相關的結論的能力是脆弱的。
簡介
背景和理論基礎
鏈球菌引起的肺炎(肺炎球菌)仍然是導致幼兒嚴重感染的主要疫苗可預防原因，盡管有有效的疫苗。第一個嬰兒肺炎球菌疫苗，7價肺炎球菌結合疫苗(PCV7)，於2000年在美國獲得許可。PCV7的引入與肺炎球菌疾病的顯著減少有關。1 - 3然而，血清型分布的地理差異4 - 7以及引入疫苗後由非pcv7血清型引起的侵襲性肺炎球菌病(IPD)的增加8需要開發更高價的pcv。
目前有兩種獲得許可的pcv: PCV10，一種使用不可分型的10價肺炎球菌疫苗流感嗜血杆菌(NTHi)蛋白D作為10種血清型中的8種的載體蛋白(SynflorixPHiD-CV;葛蘭素史克);以及PCV13，一種13價肺炎球菌CRM197結合疫苗(prevnar 13 / Prevenar-13；輝瑞)。就共享血清型的初級序列後免疫原性而言，兩者都已被證明不低於PCV7。9 - 11盡管PCV10和PCV13已經存在好幾年了，但迄今為止還沒有發表的研究直接比較它們的初級序列免疫原性或對鼻咽部(NP)轉運的影響。
pcv的費用是低收入和中等收入國家引進疫苗的主要障礙;因此，研究減少劑量的備選方案是非常重要的。在亞洲引入PCV的速度特別慢。目前在世界範圍內，PCV的引入有三種常規方案:3+1方案(三劑初級係列，隨後在生命的第二年進行助劑)、3+0方案(三劑初級係列，但不進行助劑)和2+1方案(兩劑初級係列，隨後在生命的第二年進行助劑)。來自美國PCV7短缺時期的數據顯示，兩劑初級係列疫苗對IPD的有效性很高，12日13客戶關係管理試驗數據197-偶聯pcv在兩劑或三劑初級係列後顯示出相當的免疫原性，盡管在兩劑後血清型6B和23F的抗體水平往往較低。14日15PCV10和PCV13的試驗也支持使用兩劑初級係列。歐洲的一項PCV10試驗直接比較了兩劑量和三劑量初級係列的免疫原性，結果顯示，對於所有10種血清型，達到保護性抗體水平(≥0.2µg/mL)的參與者比例相似。16在墨西哥的一項PCV13試驗中，除6B和23F血清型外，超過93%的參與者在兩次劑量後對13種血清型中的大多數達到了保護性抗體水平(≥0.35µg/mL)。17在歐洲進行的四項直接比較PCV13和PCV7反應的試驗顯示，兩劑疫苗之間的免疫反應相當。18
在發展中國家，在生命的頭一年采用2+1計劃加上強化劑量可能是有利的。這一修改後的時間表可能會提高依從性，將提供接近肺炎球菌疾病高峰發病率的全麵免疫，並可能使加強劑量與麻疹疫苗接種相一致。或者，進一步減少PCV計劃，隻有兩劑可能是最佳的肺炎球菌疫苗接種。我們之前在斐濟進行的試驗表明，在14周齡時單劑量注射PCV7後，7種血清型中的5種達到了保護性抗體水平。15此外，與四種血清型的兩劑或三劑初級係列相比，在12月齡時接種23價肺炎球菌多糖疫苗的單劑初級係列具有更強的免疫原性，其他三種血清型的免疫原性也相當。19來自南非的一項PCV9試驗也表明，在6周齡時注射一劑疫苗會對7種血清型產生顯著反應，20.來自美國的建模數據表明，單劑量PCV可預防高達62%的IPD。21最近，在英國，常規的嬰兒PCV疫苗接種已經實施了10年以上，與針對9種血清型的2+1計劃相比，PCV13的1+1計劃被證明能引起相同或更好的強化後反應。22
鼻咽部攜帶肺炎球菌通常是IPD的先決條件，也是細菌的通常傳播途徑。肺炎球菌疫苗的群體效應是由對NP攜帶的影響介導的。23PCVs疫苗接種通常導致疫苗型(VT)肺炎球菌攜帶的減少，這是在加強劑量後最常見的，通常伴隨著非VT攜帶的代償性增加。汽車出行很少有試驗評估不同PCV時間表對運輸的影響。來自荷蘭的一項試驗表明，與對照組相比，兩劑初級係列加或不加助推器可減少12月齡時的室速。28在18個月時，與未接受強化劑量組相比，接受強化劑量組的VT嬰兒期進一步減少，盡管這種差異在24個月時不再持續。同樣，我們在斐濟的試驗表明，與對照組相比，兩劑或三劑初級係列(含或不含助推劑)在12月齡時減少了VT的發生，但在17月齡時無差異(F Russell，個人溝通)。
有假說認為，PCV10中的蛋白D載體可能對流感嗜血杆菌馬車。最近一篇關於含蛋白d的pcv對NTHi運輸影響的綜述得出結論，盡管運輸密度的變化還有待評估，但任何此類影響都可能是小的和短暫的。兩項大型III期試驗(11價PCV的POET試驗和PCV10的COMPAS試驗)顯示，在肯尼亞的幼兒中進行的PCV10試驗以及PCV加強劑量後，NTHi攜帶減少的趨勢，但在芬蘭、荷蘭和捷克共和國進行的其他試驗顯示，PCV10對NTHi攜帶沒有影響。29
該試驗包括6個嬰兒疫苗接種計劃:4個不同的PCV10計劃(A組，2、3、4和9個月大時的3+1計劃;B組，2、3、4個月時的3+0計劃;C組，2+1計劃分別在2個月、4個月和9.5個月;和D組，在2個月和6個月時采用兩次劑量計劃);2+1 PCV13計劃在2個月、4個月和9.5個月時(實驗組E);以及在18個月和24個月時接受兩劑PCV10的對照組(實驗組F)。由於最近對僅注射一劑或兩劑PCV的計劃有興趣，這可能足以在人群水平上維持群體免疫，因此在18個月時招募了一個額外的對照組，以便與最初的對照組(實驗組G)進行比較。
選擇比較國的解釋
2013年協議最終敲定時，越南還沒有獲得PCV許可的公司。因此，納入沒有接受嬰兒劑量PCV的對照組是合理的。在嬰兒期招募的對照組參與者在18和24個月大時接受兩劑PCV10。對照組參與者在18個月齡時招募，在24個月齡時接受單劑量PCV10。幹預組的參與者在出生後的第一年至少接受兩劑PCV。所有參與者都接受了肺炎球菌免疫接種，這可能是有效的，在越南沒有其他方法。評估的具體方案是基於未來可能的全球推薦，並直接比較兩種獲得許可的pcv。
對於兩種疫苗共有的血清型，PCV10和PCV13都已被證明不低於PCV7，並且有可能對所包括的其他血清型提供保護。9 - 11對於這兩種疫苗，最常見的不良反應是注射部位發紅和過敏，這在接種其他疫苗後也很常見。其他不良反應包括嗜睡;食欲不振:暫時的食欲不振;注射部位疼痛、發紅或腫脹;和發燒。這種反應通常是暫時的。
目標
本試驗旨在同時回答兩個獨立的問題，涉及到對包含PCV10的不同時間表的評估以及PCV10和PCV13的比較:
加入PCV10的擴大免疫計劃疫苗的最佳提供時間表是什麼?而且
用PCV10或PCV13接種疫苗的反應如何比較?
兩個研究問題的主要終點都是原發性係列免疫原性。對於這一終點，來自A和B的數據是合並的，因為它們接受相同的三劑量主係列(見表1有關試驗武器的詳細描述)。每個研究問題的主要分析是評估初級序列後免疫原性的非劣性(根據受試者達到血清型特異性IgG≥0.35µg/mL的保護水平的比例)，使用A組+B組作為比較器(詳見下文)。對PCV10中的10種血清型中的每一種進行非劣效性評估，如果發現10種血清型中的至少7種，則得出非劣效性的總體結論。
加入PCV10的擴大免疫規劃(EPI)疫苗的最佳提供時間表是什麼?
主要目標
主要目的是比較2、4和9.5月齡時的2+1計劃和2、3、4和9月齡時的3+1計劃。主要假設是，兩劑主要係列(實驗組C)與三劑主要係列(實驗組a +B)相比，具有抗體保護水平的參與者比例並不低。這些表還將與IgG的幾何平均濃度(GMCs)和調理吞噬後一級序列進行比較;抗體保護水平、IgG GMCs和增強後調理吞噬作用的參與者比例;記憶b細胞反應;以及對鼻咽(NP)攜帶率和感興趣細菌密度的影響。
關鍵二級目標
研究2月齡和6月齡的實驗性兩劑量計劃(臂D)與3+1計劃(臂a±B)和2+1計劃(臂C)的比較;而且
為了評估加強劑量對肺炎球菌和NTHi NP傳播的影響，比較3+1計劃(實驗組a)與3+0計劃(實驗組B)以及未接種疫苗的對照組(實驗組F)。
用PCV10或PCV13接種疫苗的反應如何比較?
主要目標
主要目的是比較2、4和9.5月齡的PCV13計劃和2、3、4和9月齡的PCV10計劃。主要假設是，兩劑PCV13初級係列(實驗組E)與三劑PCV10初級係列(實驗組a +B)相比，具有抗體保護水平的參與者比例並不低。這些表還將與IgG的GMCs和調理吞噬後一級序列進行比較;抗體保護水平、IgG GMCs和增強後調理吞噬作用的參與者比例;記憶b細胞反應;以及對鼻咽(NP)攜帶率和感興趣細菌密度的影響。
關鍵二級目標
比較2、4和9.5月齡在2+1計劃中的PCV10(臂C)和PCV13(臂E);而且
比較單劑量PCV10(實驗臂D)和PCV13(實驗臂E)的反應。
額外的目標
與第二對照組(G組)有關的其他目標是:
評估18月齡單劑量PCV10，比較18、19和24月齡F和G組血清型特異性抗體水平;而且
比較其免疫原性和反應原性Infanrix-hexa在18個月大的兒童中接受了三劑Infanrix-hexa或Quinvaxem在嬰兒期(手臂G)。
試驗設計
越南肺炎球菌項目是一項單盲、開放標簽、隨機對照的II/III期非劣效性試驗，旨在調查更適合發展中國家使用的簡化兒童疫苗接種計劃。這是一項七組試驗，包括六種不同的嬰兒疫苗接種計劃(組a - f)和在18個月大時招募的額外對照組(組G) (表1)．Arm A在2、3、4和9月齡(3+1)時接受PCV10;臂B在2,3,4個月(3+0)時接受PCV10;C臂在2,4和9.5個月(2+1)時接受PCV10;D組在2個月和6個月時接受PCV10(兩次劑量);臂E在2,4和9.5個月(2+1)時接受PCV13;F組在18個月和24個月時接受兩劑PCV10;G組在24個月時接受一劑PCV10。參與者還收到Infanrix-hexa(百白破- hib - hbv - ipv)而不是常規的擴大免疫疫苗Quinvaxem(DTP-Hib-HBV): A-F組參與者四劑，G組參與者一劑。
和分析方法
研究背景
PCV在亞洲的推廣一直緩慢，部分原因是缺乏本地或區域性的PCV影響數據。我們選擇了東南亞國家越南作為試驗地點，因為越南擁有強大的衛生係統，有開展相關臨床試驗的記錄，而且政府對試驗和在不久的將來引入PCV都有濃厚興趣。此外，來自越南的試驗結果可能被認為適用於該區域的其他國家。這是在越南最大城市胡誌明市進行的第一次涉及嬰兒的試驗。試驗在第4區和第7區兩個地區進行。各區被劃分為市鎮，每個市鎮都有一個保健中心，提供包括擴大免疫方案在內的預防性保健服務，以及一些初級保健服務。研究在每個區的一個公社保健中心進行，參與者來自該地區內的周圍公社。
合格標準
入選標準
受試者必須滿足以下所有入選標準，才有資格參與:年齡在2個月至2個月加2周(手臂A-F)或年齡在18個月至18個月加4周(手臂G);無明顯的孕產史或圍產期史;懷孕36周或之後出生的;父母/法定監護人的書麵知情同意;生活在距離公社保健中心約30分鍾的範圍內;預期未來22個月在研究區內生活(選項A-F)或6個月(選項G);兩種都注射了三劑Quinvaxem或Infanrix-hexa在嬰兒期(僅G臂)。
排除標準
基線時符合以下任何排除標準的受試者將被排除在參與研究之外:已知對疫苗的任何成分過敏;對以前接種的疫苗過敏或過敏反應;已知的免疫缺陷疾病;已知的感染艾滋病毒的母親;已知血小板減少或凝血障礙;免疫抑製藥物;自出生以來給藥或計劃給藥任何免疫球蛋白或血液製品;嚴重的出生缺陷需要持續的醫療護理;慢性或進行性疾病;癲癇發作; history of invasive pneumococcal, meningococcal or流感嗜血杆菌b型疾病，或破傷風、麻疹、百日咳或白喉感染;通過擴大免疫方案(A-F)接收任何2個月的疫苗，或接收PCV (G);或者家人打算給孩子Quinvaxem(武器f)。
幹預措施
PCV時間表
在嬰兒期招募的合格參與者被隨機分配到六種不同疫苗接種計劃中的一種(表1)．隨機分到a - d組的參與者在2、3、4和9個月大時接受3+1計劃的PCV10;在2、3、4個月齡時進行3+0計劃;在2、4和9.5月齡時采用2+1計劃;或者分別在2個月和6個月大的時候進行兩次注射。隨機分到E組的參與者在2個月、4個月和9.5個月時接受2+1計劃的PCV13。對照組參與者如果被隨機分配到F組，則在18和24月齡時接受PCV10;如果被招募到G組，則在18月齡時接受PCV10。PCV是在18個月以下的兒童大腿前外側肌肉注射，在18個月及以上的兒童手臂三角肌注射。所有疫苗接種都由受過嬰兒疫苗接種專門培訓的護士進行。
PCV10
PCV10 (Synflorix)是一種10價肺炎球菌多糖結合疫苗，使用蛋白D (NTHi中高度保守的表麵蛋白)作為主要載體蛋白。PCV10呈現為渾濁的白色懸浮液在一個兩劑量小瓶。一劑為0.5 mL的液體疫苗，包含1、5、6B、7F、9V、14和23F血清型肺炎球菌多糖1µg和4、18C和19F血清型肺炎球菌多糖3µg。血清型1、4、5、6B、7F、9V、14和23F與蛋白D結合;血清型18C與破傷風類毒素載體蛋白結合;血清型19F與白喉類毒素載體蛋白結合。
PCV13
PCV13 (prevnar 13)是一種13價肺炎球菌多糖結合疫苗，使用無毒的白喉CRM197載體蛋白。PCV13呈現為0.5 mL懸浮液在單劑量預填充注射器中。一劑含有約2.2 μ g來自血清型1、3、4、5、6A、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F的肺炎球菌多糖，4.4 μ g來自血清型6B的肺炎球菌多糖。
停止或修改分配的幹預的標準
本研究參與者的劑量沒有修改。如果受試者對疫苗接種有過敏或過敏反應，他們將被退出研究。如果參與者在研究過程中拒絕任何進一步的研究程序或製定任何排除標準，他們的父母/合法監護人也可以在任何時候自願退出，或由研究人員退出。
改善和監測堅持的策略
家長保存的健康記錄卡上記錄了預定的探望日期。如果參與者沒有參加預定的訪問，將從研究診所撥打一個提醒電話。如果無法直接聯係到參與者，則通過電話或家訪聯係當地的社區保健中心，以便進一步跟進。
相關的護理
參與者收到Infanrix-hexa這種疫苗隻在私人市場上出售，而不是常規的擴大免疫方案疫苗Quinvaxem．武器A - f的參與者在下列時間表之一接受四劑接種:2、3、4和19個月(武器A和B);2個月、4個月、9.5個月和19個月(武器C和E);2、4、6和19個月(D組);或2、3、4和18個月(F組);G組的參與者在18個月大時服用一劑。在研究過程中還提供了常規的擴大免疫方案麻疹和麻疹-風疹免疫接種:9月齡時接種麻疹，18 (A-E組)或19 (F-G組)月齡時接種麻疹-風疹。被分配到2+1疫苗接種計劃之一(武器C和E)的參與者在9個月大時接種麻疹，並接受PCV和Infanrix-hexa2周後。對於兩次接種疫苗的探訪者，在不同的肢體上接種疫苗。本研究允許接種其他疫苗，與研究疫苗之間間隔2周，除Quinvaxem在武器f。其他藥物也被允許，免疫抑製藥物和被列為研究疫苗禁忌症的藥物除外。
結果
主要結果測量
主要結局指標是PCV10和PCV13共有的10種血清型特異性IgG的濃度，在初級係列後4周評估，並使用改進的第三代標準化ELISA測定。30.各組間的初步比較是根據抗體濃度≥0.35µg/mL的單個血清型兒童比例進行的。0.35µg/mL的臨界值是通過對療效試驗數據的彙總分析確定的31並被用作批準新的pcv的非劣效性評估的基礎。尺碼
二次免疫原性結局測定
所有PCV13血清型特異性IgG抗體濃度用ELISA法從所有血液樣本(表1)，並根據抗體濃度≥0.35µg/mL的兒童比例和GMC進行總結。
所有PCV13血清型的調理指數(OIs)通過調理噬細胞法(OPA)測定35對於每個幹預組(A-E組)的100名參與者，分別在原發性係列治療後4周和強化治療後4周，並根據OI≥8的參與者比例和幾何平均滴度進行總結。
ELISPOT列舉了血清型1、5、6B、14、18C、19A和23F的多糖特異性記憶B細胞35每個幹預組(A-E組)在18個月大的時候進行50次注射，每個對照組(F組和G組)在18和24個月大的時候進行100次注射。結果總結為抗體分泌細胞的中位數。
鼻咽運輸結局測量
肺炎球菌血清型的NP攜帶通過傳統培養(菌落形態、α-溶血、optochin試驗和lytAPCR顯示)36所有組在2、6、9和12月齡時使用類型特異性抗血清進行乳膠凝集，對照組(F和G組)在18和24月齡時使用類型特異性抗血清進行乳膠凝集。通過實時定量PCR (qPCR)靶點檢測肺炎球菌血清型的NP攜帶和密度lytA在18和24個月大的時候使用微陣列。37 38總體而言，描述了膠囊、疫苗型和血清型特異性攜帶率。采用臨床和實驗室標準協會(CLSI)圓盤擴散法測定肺炎球菌分離株在12月齡時對唑西林、紅黴素、甲氧苄啶/磺胺甲新諾明、氧氟沙星、克林黴素、萬古黴素、四環素和氯黴素的耐藥性。在指示的地方進行青黴素、頭孢曲鬆和萬古黴素的e -試驗，並應用CLSI斷點。
NP運輸流感嗜血杆菌是由傳統文化衡量的(殖民形態，X和V依賴，SiaTPCR用於區分h . haemolyticus和Phadebact嗜血杆菌凝集試驗)，各組12月齡時，A和C組6和9月齡時，以及對照組(F和G組)的所有拭子流感嗜血杆菌用qPCR靶檢測載體保護局而且SiaT診斷目標為18和24個月大。39 40
免疫原性的Infanrix-hexa
免疫原性的Infanrix-hexa以白喉、破傷風、Hib PRP抗原、乙型肝炎表麵抗原和百日咳博德特氏菌．IgG水平將通過ELISA法測定，使用商業檢測試劑盒。
血液和NP樣本的收集、運輸和實驗室分析程序的概述可在網上找到補充附錄1．
樣本大小
招募嬰兒(A - F組)的目標樣本量為1200人，分配比例為3:3:5:4:5:4，因此目標組規模為A=150, B=150, C=250, D=200, E=250, F=200。另外，200名18個月大的兒童被納入g組。樣本量的計算基於兩個研究問題的初級序列免疫原性後的主要結果(血清型特異性抗體濃度≥0.35µg/mL的參與者的比例)。按照監管機構的標準，絕對風險差異10%的非劣效邊際值被認為具有臨床意義。對PCV10的10種血清型進行非劣效性評估(將A+B組與C組或E組進行比較)，如果對10種血清型中的至少7種接受替代假設，則得出總體非劣效性結論。這個樣本量為非劣性的總體結論提供了99%的可信度，而片麵的I型錯誤率為5%，這是通過使用為在Stata中進行10000次重複而編寫的定製程序進行模擬估算得出的。41根據PASS Software 2002使用Farrington-Manning(1990)方法計算，血清型特異性假設的冪範圍從83%到>99%。42根據我們在斐濟早期工作的發現和文獻中可用的數據，43-45血清型1、4、5、7F、9V、14和19F的抗體濃度≥0.35µg/mL的假設概率為95%;血清型18C為90%;血清型23F為80%;血清6B型為75%。通過隨機效應邏輯回歸模型中SD為1.7的受試者水平變異項來捕獲多個二元終點之間的受試者內相關性，並假設首次隨訪後損失率為5%，12月齡時損失率為10%。樣本量也提供了98%的能力來檢測兩劑量PCV10或PCV13後原發性係列免疫原性的差異，根據Fisher確切檢驗(5%雙側)定義的絕對風險差異為10%。
馬車的結果
樣本量提供了76%和71%的檢出率，分別在a組和F組和a組和B組之間檢測12月齡NTHi攜帶率的差異，64%和59%的檢出率分別在a組和F組和a組和B組之間檢測疫苗型肺炎球菌攜帶率的差異。運輸差異的相對風險為0.6。根據來自越南的數據(L Yoshida，個人溝通)，計算基於Fisher確切檢驗(5%單側)，假設F組(對照組)的NTHi感染率為30%，疫苗型肺炎球菌感染率為24%。
招聘
A-F組的參與者是從登記期間在研究公社出生的嬰兒中招募的。公社保健中心的工作人員根據公社保健中心的出生記錄確定可能參加保健的人。根據預期的出生人數，在研究市鎮出生的嬰兒中約有四分之一需要登記，以便在12個月的目標登記期內完成征聘工作。將每月監測征聘率，並與研究人員和社區保健中心工作人員舉行會議，討論征聘率是否顯著下降。當嬰兒大約6周大時，公社保健中心的工作人員前往可能參加試驗的家庭，用越南語提供有關試驗的口頭和書麵信息。當嬰兒大約2個月大時，有興趣參與研究的人將被轉到研究診所。此時，獲得書麵知情同意(在線補充附錄2)，然後由研究護士/醫生檢查嬰兒，以確保符合所有資格標準。G組的參與者是從研究社區中18個月大的兒童中招募的，與A-F組18個月大的兒童平行。
分配
a - f組的分配順序是使用計算機生成的隨機數字列表，使用區塊隨機方案，按地區分層。小組分配包含在研究診所的一個密封信封中，信封外麵寫著順序的ID號碼。分配序列由Menzies衛生研究學院生成。研究醫生將登記參與者，並通過選擇下一個可用的信封將他們分配到一個研究小組。直到完成知情同意和資格評估程序後，才會打開信封。
基礎墊層
所有實驗室工作人員都不知道研究組的分配，因為解決研究目標的關鍵結果指標都是基於實驗室的。實驗室樣本標有ID號，但不標識研究小組。鑒於不同組的疫苗接種時間表時間不同，研究護士、疫苗管理員和參與者不會對研究組的分配盲目。
數據收集方法
使用標準化的碳拷貝數據收集表格，並由專門的、訓練有素的研究人員完成。原件被運送到試驗辦公室進行數據錄入，複製件則在診所存檔。血液樣本和NP拭子由收集嬰兒樣本方麵受過專門培訓的工作人員收集，並記錄采集的血量和拭子質量。
保留:預約記錄在家長持有的健康記錄卡上，並在預約就診前一周撥打提醒電話。如果參與者沒有參加預約，則會通過後續電話重新預約。參與者將獲得一筆小額的費用，作為每次研究訪問來診所的交通費。錯過研究訪問的參與者將繼續接受隨訪，在可能的情況下進行樣本收集和疫苗注射，並嚐試與他們聯係，直到他們完成研究。
數據管理
數據收集表單由專門的數據輸入人員雙重輸入到預先編碼的EpiData V.3.1文件中，具有內置範圍和一致性檢查。輸入的數據每月進行一次驗證，然後上傳到存儲在安全服務器上的中央Microsoft Access數據庫。免疫學結果在微軟Excel電子表格中重複輸入。NP培養結果輸入Microsoft Access數據庫，qPCR和微陣列結果從SentiNET導出到Microsoft Excel數據庫。數據收集表格與實驗室結果在分析時相關聯。
統計方法
主要和次要結果分析
對於這兩個研究問題，主要目的是比較(1)PCV10和(2)PCV13的2+1時間表與PCV10的3+1時間表。主要轉歸是首次試驗4周後(5月齡時)血清型特異性抗體濃度≥0.35µg/mL的受試者比例。A組和B組的數據合並形成三劑量的一期後係列組。初步分析評估了(1)在2和4個月大時注射兩劑PCV10(實驗組C)與在2、3和4個月大時注射三劑PCV10(實驗組A+B)的非劣效性;(2)在2和4月齡時給予2劑PCV13(實驗組E)，與之相比，在2、3和4月齡時給予3劑PCV10(實驗組A+B)。針對10種PCV10血清型中的每一種，測定兒童在初級係列後4周達到血清型特異性IgG(≥0.35µg/mL)保護水平的比例。非劣效邊際由絕對風險的10%差異定義。CI為90%的血清型特異性風險差異(A組+B組/ C組)使用紐科姆評分方法計算，如果CI的上限<10%則拒絕原假設。如果10個個體零假設中至少有7個在片麵的5%顯著性水平上被拒絕，則宣布總體非劣性。針對主要目標的輔助數據分析包括gmc的初級後係列(臂C/臂A+B和臂E/臂A+B)與95% ci的比率，以及通過協方差分析分析助推器反應，調整預助推器水平。
研究問題1的主要次要目標分析
將評估2月齡時單劑量的PCV10(實驗組D)是否低於2、3和4月齡時的三劑量(實驗組A+B)，如主要目標所述。
加強劑量對肺炎球菌和NTHi攜帶的影響將在12月齡時進行評估。將確定整體肺炎球菌、莢膜肺炎球菌、PCV10類型和NTHi攜帶率。首先將比較3+1組(手臂A)和對照組(手臂F)的比例，使用Fisher精確檢驗。在發現顯著差異的地方，將比較3+0組(B組)與對照組以及3+1和3+0組之間的比率。
研究問題2的主要次要目標分析
將比較兩劑PCV10或PCV13的免疫原性與血清型特異性抗體濃度≥0.35µg/mL(10個共有血清型)的受試者比例的關係，在初級係列4周後(5月齡時)。將PCV10(實驗組C)與PCV13(實驗組E)進行比較，其絕對風險差異為10%，表明兩者存在顯著差異。如果10個獨立零假設中至少有7個被拒絕，且7個差異方向相同，則表明兩者存在總體差異。
將比較單劑PCV10或PCV13的免疫原性，如兩劑免疫原性所述。
額外的分析
將對OPA、ELISPOT和微陣列數據進行組級描述性分析。
的數量分析
將對每個協議種群進行分析。主要非劣效性分析將在意向治療人群(ITT)中重複進行，所有參與者在他們隨機分組的組中進行分析。每個協議和ITT分析之間的任何差異都將被報告。對於每個結果，所有可用的數據都將有助於分析。為了調查數據是否完全隨機缺失，我們將探索基於基線協變量的不同研究部門之間的減員情況是否不同。如果差異損耗依賴於基線變量，我們將使用建模方法來調整任何此類基線因素，並將在主要分析的同時呈現調整結果。
額外的分析群體
外地加工活動將在每組100名參與者中進行。每組的前100名參與者都有初級係列和強化後血液樣本，將有助於OPA分析。
b細胞檢測將對a - e每組50名參與者進行，對F和g每組100名參與者進行。每組登記的最後50/100名參與者將采集血液樣本用於b細胞分析。
數據監控
數據監控委員會:安全監督由獨立的數據安全和監控委員會(DSMB)指導，根據試驗辦公室保存的DSMB章程。DSMB將每年召開大約三次會議，審查與安全性、數據完整性和試驗整體實施相關的總體和個體參與者數據，包括對所有嚴重不良事件(sai)的詳細審查。
中期分析和停止指南:不計劃進行中期分析。停車指南是基於安全的。如果出現嚴重的安全問題，將召開DSMB特別會議，提出終止試驗的建議。終止的最終決定由主要研究人員和主辦方決定。
危害
在整個研究過程中，將收集有關SAEs的數據，在每次研究訪問期間，通過定期檢查醫院記錄，詢問父母的住院情況和重要體征和症狀。任何突發事件的詳細情況將記錄在越南衛生部的標準報告表上，並向主要調查人員和倫理委員會報告。在接種疫苗後，參與者將接受30分鍾的觀察，以監測任何不良反應，並將在接種疫苗後72小時內的反應原性信息記錄在家長的日記卡上。
審計
FHI360將提供外部現場監測，以獨立評估協議和良好臨床規範(GCP)的符合性。監測訪問將在研究開始、結束和每個研究診所大約每年兩次。將對100%的知情同意書和sae以及隨機選擇的約20%的參與者文件夾、試驗監管文件和實驗室記錄進行監測。
患者和公眾的參與
患者沒有參與研究的開發、設計、招募或進行。在設計階段，區一級進行了社區谘詢，區和市一級的衛生部和胡誌明市人民委員會也對設計進行了討論和批準。研究人員將通過郵寄方式通知參與者整體研究結果，並在最後一次研究訪問時收集其郵寄地址。
道德和傳播
研究倫理批準
該議定書、簡單語言聲明(PLS)和知情同意書(ICF)已獲得胡誌明市巴斯德研究所的機構審查委員會、越南衛生部倫理審查委員會、北部地區衛生部人類研究倫理委員會和Menzies衛生研究學院的批準。兩個倫理委員會每年都會收到試驗進展報告，以便繼續批準試驗。
協議的修正案
對方案的任何可能影響研究進行的修改都將記錄在正式的方案修正案中，並在修改實施前得到雙方倫理委員會的批準。修改後的協議將被賦予一個新的版本號和日期。對於規程的任何輕微更正/澄清或行政變更，也將通知倫理委員會，並將其記錄在規程修正函中。ClinicalTrials.gov記錄中也將更新重大的協議更改。
同意
獲得同意
同意過程由經過專門培訓的研究人員進行。研究人員將與潛在參與者的父母/法定監護人詳細討論翻譯成越南語的PLS和ICF。然後研究人員將進一步討論試驗並回答可能出現的任何問題。在嬰兒參加研究之前，需要書麵的知情同意。由於參加者年齡太小，無法自行提供同意書，因此須取得父母/法定監護人的同意。申請人的父母/法定監護人將會收到一份PLS及ICF的副本，以備存檔。
輔助研究
為未來與試驗相關的研究而無限期儲存血液和NP樣本的具體同意，將獲得父母/法定監護人的同意，並記錄在ICF上。未來的任何研究都將接受倫理審查。任何不同意無限期保存的樣品將在試驗結束時銷毀。
保密
所有與研究相關的信息將被安全儲存，並嚴格保密。所有保存在研究診所的文件，包括icf和參與者文件夾，都存放在上鎖的櫥櫃中。所有集中保存的文件都存放在審判辦公室，並上鎖。電子數據存儲在試驗辦公室和受密碼保護的安全服務器上。電子數據和實驗室樣本由唯一的參與者編號編碼，不包含參與者名稱。FHI360將被授權訪問參與者的信息以進行監控，如有需要，倫理委員會或DSMB也將被授權訪問參與者的信息。
訪問數據
最終的試驗數據集將由試驗讚助商默多克兒童研究所(MCRI)保管。首席研究員、試驗經理和試驗統計員將有權訪問完整的匿名最終數據集。
輔助和試驗後護理
建議參與者到研究診所接受輔助護理，或到胡誌明市第二兒童醫院，在那裏他們不收取治療和服務費用。所有參與者都有臨床試驗相關傷害保險。
傳播策略
計劃
研究人員將通過郵寄方式通知參與者整體研究結果，並在最後一次研究訪問時收集其郵寄地址。試驗完成後，研究結果將發表在同行評議的期刊上，並在相關國際會議上發表。MCRI與胡誌明市巴斯德研究所和葛蘭素史克生物公司之間的協議規定，在提交發表的手稿之前，一方必須獲得其他方的事先批準，而且這種批準不會被無理拒絕。
作者
出版小組委員會將審議所有提議的出版物，關於內容和作者的最後決定由首席研究員作出。每個作者的角色將被公布。在適當的情況下可以使用組作者。沒有使用專業作家的計劃。
可再生的研究
目前還沒有計劃允許公眾訪問完整的協議、參與者級別的數據集或統計代碼。
致謝
作者感謝研究參與者和他們的家人。
參考文獻
腳注
貢獻者BT參與了研究設計，主導了資金和倫理應用，參與了試驗的日常管理和數據分析，起草了方案和本手稿。NTT就研究的設計和選址提供谘詢，參與了越南的批準過程，並參與了試驗的日常管理和實施。大連大學為研究的設計和選址提供了建議，並參與了試驗的日常實施。AB為研究設計提供谘詢，協助資金申請，並對免疫學實驗室程序提供谘詢和監督。KB為研究的設計和選址提供谘詢，並負責試驗的日常管理和實施。YBC就研究設計和資金申請，特別是試驗的統計方麵提供了建議。PL為研究設計提供建議，協助資金申請，並對免疫學實驗室程序提供建議和監督。CDN為研究設計和統計分析方案提供建議。NTMP為研究的設計和選址提供了建議，參與了越南的批準過程，並參與了試驗的日常管理。課題組就研究設計提供意見，協助申請資助，並就微生物實驗室程序提供意見和監督。 HS-V advised on the study design, assisted with the funding applications, and advised on and provided oversight of the microbiology laboratory procedures. TQHV advised on the study design and advised on and provided oversight of the laboratory procedures at Pasteur. TNH advised on the study design and location, undertook consultations, was involved in the approval processes in Vietnam and has had overall responsibility for the conduct of the trial in Vietnam as Site Principal Investigator. EKM conceived the study, undertook consultations, provided oversight for the funding and ethics applications, provided oversight for the conduct of the trial and data analysis, and has had overall responsibility for all aspects of the trial as the Principal Investigator. All authors contributed to refinement of the study protocol and reviewed and approved this manuscript.
資金這項工作得到了澳大利亞國家衛生和醫學研究委員會的支持(批準號:566792)和比爾和梅琳達·蓋茨基金會(批準號為566792)。OPP1116833)。PCV10的劑量和調理吞噬細胞試驗的資金由葛蘭素史克公司(GSK)提供。
相互競爭的利益所有作者都從澳大利亞國家衛生和醫學研究理事會和/或比爾和梅林達·蓋茨基金會的贈款中獲得薪金支助。葛蘭素史克生物公司提供非財政支持(以PCV10疫苗劑量的形式)和對消噬細胞試驗的資金。EKM是目前Novavax試驗的DSMB成員，他為此收取谘詢費。他曾從GSK集團公司獲得過一次國際會議的差旅費，並從默克公司獲得過一次顧問團會議的酬金。他沒有向製藥公司提供任何有償谘詢服務，也沒有從製藥公司獲得任何研究資金。CS團隊的成員曾獲得輝瑞資助(但未進行評估)的獎項。所有作者都沒有其他利益需要聲明。
病人的同意監護人同意。
倫理批準越南衛生部倫理委員會、北部地區衛生部人類研究倫理委員會和孟席斯衛生研究學院。
來源和同行評審不是委托;外部同行評議。